نظام مراقبة معدل استهلاك الأكسجين الخلوي من لوسيد ساينتيفيك ريسيفير
تحديد
- اسم المنتج: ريسيفير
- وظيفة:تحليل المراقبة المستمرة في الوقت الحقيقي لعملية التمثيل الغذائي الخلوي
- نطاق الحد الأقصى للقراءة الضوئية (fmol/mm2/s)
- الحجم (ميكرولتر): 65، الحد الأقصى للتعرف الضوئي على الحروف: 275-325
- الحجم (ميكرولتر): 100، الحد الأقصى للتعرف الضوئي على الحروف: 180-220
- الحجم (ميكرولتر): 150، الحد الأقصى للتعرف الضوئي على الحروف: 115-140
- الحجم (ميكرولتر): 200، الحد الأقصى للتعرف الضوئي على الحروف: 90-100
يقدم هذا الدليل الموجز نصائح وإرشادات أساسية لبدء تجارب تحليل المراقبة المستمرة اللحظية باستخدام نظام Resipher. سيعزز نظام Resipher تجاربك في مجال الأيض الخلوي بتحويل أطباق زراعة الخلايا القياسية إلى أجهزة قراءة ذكية محمولة تستشعر التغيرات الأيضية اللحظية. راجع أيضًا دليل المستخدم الكامل للاطلاع على إعدادات النظام والتجارب التفصيلية. تجدون أدناه "دليل البدء السريع" و"دليل المستخدم الكامل": 
- ابدأ ببساطة
في تجربتك الأولى، نوصي بالبدء بتجربة بسيطة لكثافة الخلايا/التلقيح. سيُمكّنك هذا من التعرّف على نظام Resipher وتحديد الشروط الأولية لتحقيق قراءات OCR الأساسية ضمن نطاق مثالي للعلاجات اللاحقة. بالنسبة لدراسات الاستجابة للعلاج التي يُمكن فيها تعديل كثافات الزرع، نوصي بتحديد خط أساس قبل العلاج يتراوح بين 30 و100 فمول/مم²/ثانية. - يجب أن تتم موازنة الوسائط والمعالجات مسبقًا مع ظروف الحاضنة
يجب معايرة الوسط/المعالجة مسبقًا لظروف الحاضنة (مثلًا، ٥٪ ثاني أكسيد الكربون، ٣٧ درجة مئوية قبل التغيير) للحصول على قياس أولي مثالي. تعتمد بيئة الأكسجين في الوسط بشكل كبير على درجة الحرارة وتوازن الغاز مع البيئة المحيطة. على سبيل المثال،ampيستغرق 100 ميكرولتر من الوسط غير المُحرَّك ما لا يقل عن ساعة إلى ساعتين للوصول إلى حالة التوازن من الظروف الجوية القياسية إلى ظروف الحاضنة النموذجية. يمكن أن يكون وقت التوازن هذا أطول بكثير في بيئات وأحجام وسط أخرى (على سبيل المثالamp(الغرف الخالية من الأكسجين). - اترك جهاز Resipher (الجهاز المحمول المزود بمنفذ USB) في الحاضنة لمدة 1-2 ساعة قبل إجراء التجربة، مع وضع أجهزة الاستشعار على لوحة Lucid المقدمة.
لا تخزّن ريسيفير في الحاضنة خارج مرحلة التسخين هذه أو أثناء التجارب النشطة. في حالة عدم التسخين المسبق أو الاستخدام، خزّن ريسيفير خارج الحاضنة في بيئة باردة وجافة. يُنصح دائمًا بترك الخلايا تستقر في قاع الآبار قبل وضع أغطية الاستشعار على ألواح الآبار. هذا يمنع الخلايا من الالتصاق بمجسات الاستشعار عن طريق الخطأ. - حجم الوسائط
يمكن أن يكون معدل التنفس الخلوي محدود الانتشار (OCR) حسب حجم الوسط. حتى في حاضنات ثاني أكسيد الكربون القياسية، قد تحدث ظروف نقص الأكسجين عندما يتجاوز معدل التنفس الخلوي هذا الحد، وقد لا تُلاحظ الزيادات المتوقعة في التنفس الخلوي. بالنسبة للمزارع النموذجية، نوصي بالبدء بـ 2 ميكرولتر. بالنسبة لأنواع الخلايا عالية الكثافة الهوائية، قد يلزم أن يكون هذا الحجم منخفضًا إلى 100 ميكرولترًا لمنع معدل التنفس الخلوي محدود الانتشار.
| مقدار (uL) | الحد الأقصى للتعرف الضوئي على الحروف (fmol/mm2/s) |
| 65 | 275-325 |
| 100 | 180-220 |
| 150 | 115-140 |
| 200 | 90-100 |
أغطية الاستشعار وأطوال المجسات
تقدم لوسيد أطوالًا متفاوتة للمجسات لمختلف أنواع الصفائح وأنظمة نماذج الخلايا (ثنائية الأبعاد، ثلاثية الأبعاد، عضوي، نسيجي، إلخ). للاطلاع على الجدول الكامل بمزيد من التفاصيل، يُرجى زيارة lucidsci.com/resources/documents: "دليل اختيار صفائح ريسيفير المعتمدة ذات 2 بئرًا وغطاء الاستشعار لزراعة الطبقة الأحادية". يجب تحديد نوع الصفائح الصحيح في القائمة المنسدلة لاختيار الصفائح في مختبر لوسيد أثناء الإعداد التجريبي لضمان دقة البيانات. إذا لم تظهر الصفائح المطلوبة، يُرجى التواصل مع فريق الدعم لدينا على support@lucidsci.com لتحديد الغطاء الصحيح لإعداداتك التجريبية.
- لا تُغلِّف أغطية الاستشعار في جهاز البخار. لا تستخدم بيروكسيد الهيدروجين. الأطباق معقمة ومخصصة للاستخدام مرة واحدة.
- ستتدهور مادة الاستشعار بمرور الوقت مع الاستخدامات المتعددة.
- قم بتخزين أغطية الاستشعار بعيدًا عن أشعة الشمس المباشرة.
الآبار الخارجية كضوابط تجريبية
يمكن استخدام آبار الحافة للتحكم. هذا يقلل من احتمالية تداخل التبخر مع البيانات المهمة.
التبخر أمر لا مفر منه
يمكن إضافة PBS إلى الآبار غير المستخدمة لتقليل تبخر الوسائط أثناء التجارب. إذا كانت حاضنتك معرضة لمشاكل التبخر، يُرجى فحص مستويات ماء حوض الحاضنة بانتظام. لقد قمنا بالتحقق من بعض ألواح 96 بئرًا، بما في ذلك لوح Nunc™ Edge™ 96 بئرًا وألواح Greiner Chimney 96 بئرًا، والتي قد تقلل التبخر.
دع الخلايا تفعل ما عليها فعله
أثناء التجربة، من الأفضل تقليل الانقطاعات، على سبيل المثالampفتح وإغلاق الحاضنة. ريسيفير جهاز حساس يستجيب للتغيرات البيئية البسيطة. يُرجى التواصل معنا إذا لم تستلم مغناطيسًا مع ريسيفير لإعلام الآخرين بأنك تُجري تجربةً، ويرجى عدم فتح الباب.
يرجى الرجوع إلى دليل المستخدم الكامل ضمن المستندات الموجودة على lucidsci.com لمزيد من التفاصيل
منشورات وبروتوكولات العملاء الرئيسيين
تان جيه، فيرتشو إس، نوريس دي إم، كونواي أو جيه، يانغ إم، بيدو جيه، جريبين سي، لوجتو إف، كامزولاس آي، كريسر جيه آر، ميلز آر جيه، ليانغ إل، بيريرا سي، ديل إم، شون-شيون إيه إس، بيرد إتش جيه، هورسكروفت جيه إيه، سوتون إيه بي، ما إم، كاروبيو إس، بيتسالاكي إي، موراي إيه جيه، غيرشليك دي سي، ناثان جيه إيه، هدسون جيه إي، فالير إل، فيشر-ويلمان كي إتش، فريزا سي، فيدال-بويغ إيه، فازاكيرلي دي جيه. نقص الأكسجين في مزرعة الخلايا القياسية يُغير أيض الخلايا المتمايزة ووظيفتها. مجلة EMBO. يونيو ٢٠٢٤؛ ٤٣(١١): ٢١٢٧-٢١٦٥. doi:
10.1038/s44318-024-00084-7. تاريخ النشر الإلكتروني: 2024 أبريل 5. PMID: 38580776؛ PMCID: PMC11148168. كلوي تيسييه، ماكسيم توجاس، أنطونيو سي. باجانو زوتولا، أندرياس بيكفالفي، توماس ماثيفيت، توماس دوبون، لوسي بريسون، أودري بوربان، أحمد شارانك، بروتوكول لقياس الطاقة الحيوية للميتوكوندريا في الوقت الفعلي في الخلايا الجذعية لأورام الدماغ المزروعة بتقنية ثلاثية الأبعاد باستخدام نظام ريسيفير، بروتوكولات ستار، المجلد 3، العدد 6، 1,2025,1، 03651 2666، ISSN 1667-XNUMX.
هاس دي تي، تشانغ كيو، أوترسون جي إيه، برايان آر إيه، إتشurley JB، Miller JML. يؤثر العمق المتوسط على توافر الأكسجين واستقلابه في مزارع RPE البشرية. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2 نوفمبر 2023؛ 1(64):14. doi: 4/iovs.10.1167. PMID: 64.14.4؛ PMCID: PMC37922158. Triolo M، Khacho M. بروتوكول لمراقبة التنفس الخلوي الحي الفوري للميتوكوندريا في خلايا عضلات الفئران باستخدام منصة Resipher. بروتوكول STAR. 10629522 ديسمبر 2024؛ 20(5):4. doi: 103330/j.xpro.10.1016. Epub 2024.103330 سبتمبر 2024. PMID: 20؛ PMCID: PMC39305486.
الأسئلة الشائعة
س: هل يمكن استخدام Resipher لمراقبة الخلايا الحية؟
ج: نعم، تم تصميم Resipher لمراقبة عملية التمثيل الغذائي للخلايا بشكل مستمر في الوقت الفعلي، بما في ذلك تحليل الخلايا الحية.
س: كيف يمكنني التعامل مع مشاكل التبخر أثناء التجارب؟
ج: لتقليل التبخر، أضف فوسفات الصوديوم إلى الآبار غير المستخدمة، وفكّر في استخدام ألواح الآبار المحددة الموصى بها في دليل المنتج. افحص بانتظام مستويات ماء حوض الحاضنة إذا كان التبخر يُثير القلق.
المستندات / الموارد
 |
نظام مراقبة معدل استهلاك الأكسجين الخلوي من لوسيد ساينتيفيك ريسيفير [بي دي اف] دليل المستخدم نظام مراقبة معدل استهلاك الأكسجين الخلوي من ريسيفير، ريسيفير، نظام مراقبة معدل استهلاك الأكسجين الخلوي، نظام مراقبة معدل الاستهلاك، نظام مراقبة المعدل، نظام المراقبة |